作者：国林 赵全兴 李梅 马建平 杨欣欣 汪冉 刁有祥

前言：说起禽流感，那可是让咱们养殖户头疼不已的“大魔头”。这禽流感，就跟咱们说的“感冒”似的，不过它可不是那么好对付的，轻则让鸡鸭们咳嗽不停，重则可能致命。自从1878年首次在意大利爆发以来，这禽流感就像一个“坏小子”，四处乱窜，给全球的养禽业带来了不少麻烦。既然没有特效药，那咱就只能靠疫苗来保驾护航了。今天，咱们就来聊聊禽流感H9疫苗的免疫途径，看看哪种方法最靠谱。

一、材料与方法

1. 试验动物

我们选用了600只1日龄的健康海兰褐蛋鸡，这可是从泰安东岳种禽有限公司精心挑选出来的。

2. 试验材料

为了这次试验，我们准备了96孔V型微量反应板、移液器、生理盐水、1％鸡红细胞悬液等工具。禽流感H9亚型血凝抑制试验抗原是由中国科学院提供的，而禽流感灭活疫苗则是从乾元浩生物股份有限公司购买的。

3. 试验动物的分组

我们把600只鸡分成了A、B、C、D、E五组，每组120只。A组是空白对照组，B组是颈部皮下注射组，C组是胸部肌肉注射组，D组是翅根部肌肉注射组，E组是腿部肌肉注射组。在45日龄和95日龄，我们分别给这些鸡注射了禽流感灭活疫苗0.5mL。为了保证试验的准确性，我们还在相同的环境下，用同样的饲料进行饲养，并且按照相同的免疫程序进行免疫预防。

4. 抗体水平检测

我们使用血凝与血凝抑制试验的方法来检测鸡的抗体水平。每隔3天，我们会随机选取15只鸡翅静脉采血，分离血清，然后根据HI法检测鸡的抗体水平，最后根据平均值绘制抗体消减曲线。

二、结果

我们可以看到，不同防疫部位下的禽流感抗体滴度如图1所示：

在45日龄免疫禽流感H9亚型疫苗后，D组抗体上升速度最快，57日龄达到了阶段性最高值，为8.2 log2。而B组抗体上升速度最慢，这主要是因为肌肉注射吸收速度快，产生抗体也快，而皮下注射疫苗吸收缓慢而均匀，产生抗体比较慢。到了57日龄，B、C、D、E组的抗体水平基本一致，抗体曲线变化相吻合，而且抗体水平一直维持在61og2以上。72日龄以后，E组抗体滴度平均值最高，而且比其他组高0.5～2.0个滴度。B、C、D组的抗体水平比较稳定，均匀度也较好。

三、讨论

通过45日龄、95日龄两次禽流感灭活疫苗的免疫，我们可以清楚地看到，腿部肌肉注射的效果最好，抗体滴度比颈部皮下、胸部肌肉、翅根部肌肉三种注射方式都要高。而颈部皮下、胸部肌肉、翅根部肌肉三种注射方式的免疫效果基本一致。

综合分析整个试验，我们发现，除了腿部肌肉注射外，其他防疫部位都注射了两种以上的疫苗。而且，每个部位吸收疫苗的能力是有限的，频繁防疫和疫苗剂量过大都会影响疫苗的吸收效果。这就提醒我们在实际操作中，要熟练掌握各种防疫手法，不能因为省时省力而每次都注射在同一部位，这样不利于疫苗的吸收，从而影响免疫效果。

在整个蛋鸡的饲养过程中，疫苗免疫需要做统筹的安排，尽量不要在短期内同一部位重复注射；同一部位的油苗注射应低于3次。